Determinació: llet, caseïna, altres proteïnes, midó i glúcids reductors i presència de lípids

DETERMINACIÓ DE LA COMPOSICIÓ DE LA LLET:
La llet conté vitamines (tiamina, riboflavina, àcid pantotènic i vitamines A, D i K), minerals (calci, potassi, sodi, fòsfor i metalls en petites quantitats), proeïnes, glúcids i lípids. Els únics elements importants que no te són ferro i vitamina C.
L'objectiu de la pràtica és identificar tots aquests components.

DETERMINACIÓ DE LA CASEÏNA:
La caseïna és una proteïna conjugada del tipus fosfoproteïna que se separa de la llet per acidificació i forma una massa blanca. Les fosfoproteïnes són un grup de proteïnes que es troben químicament unides a àcid fosfòric, en el cas de la caseïna aquests grups fòsfor es troben units als aminoàcids serina i treonina. La caseïna representa entre 77 i el 82% de les proteïnes presents a la llet. Aquesta proteïna presenta una baixa solubilitat a pH 4,6. En la primera part del experiment aïllareu la caseïna.
1- Afegiu 200ml de llet en un vas de precipitats i escalfeu fins 40 graus aproximadament.
2- Traieu-lo del foc i afegiu gota a gota àcid acètic (1ml d'àcid acètic glacial en 10 ml d'aigua destil.lada) amb un comptagotes. Agiteu amb una vareta de vidre fins que acabi de precipitar tota la caseïna.

3- Separeu la caseïna amb ajuda d'una espàtula i poseu-la en un vidre de rellotge. Poseu-lo a assecar en la placa calenta.
4- Afegir immediatament en el líquid que us ha quedat 4 gr de carbonat de calci en pols. Agiteu al llarg d'uns minuts i guardeu-lo per la següent part. Això és el sèrum de la llet.
5- Quan la caseïna hagi perdut l'aigua calculeu el percentatge de caseïna aïllada sabent que la densitat de la llet és 1,03 g/ml.

206g-------27'3g          

100.........X             X=13'15       

DETERMINACIÓ D'ALTRES PROTEÏNES:

1-Determineu la presència d'altres proteïnes en l'extracte (sèrum) de la pràctica anterior mitjançant la prova de Biuret. 

2-Per poder realitzar la pràctica heu d'utilitzar:

- 2ml de sèrum 

- 2ml d'hidròxid de sodi

- 5 gotes de sulfat de coure 

DETERMINACIÓ DE MIDÓ I GLÚCIDS REDUCTORS:

1-Determineu si la llet conté midó en el producte que heu extret (sèrum) de la pràctica anterior. 

2-Determinar la presència de glúcids reductors.

3-Per realitzar la pràctica heu d'utilitzar:

- Petita quantitat de sèrum + lugol 

- Sudan III 

DETERMINACIÓ DE LA PRESÈNCIA DE LÍPIDS:

1-Determineu la presència de lípids de la llet en un tub d'assaig amb 2ml de llet. 

2-Afegiu 1ml d'HCL al 50% al tub d'assaig anterior i escalfeu suaument, anoteu els resultats que observeu. 

3-Proveu-lo també amb el sèrum de la llet de la pràctica 1. 

4-Utilitzeu 2ml fehling A/B.

(Roger's photo blog)

PROVA	PROVA UTILITZADA	RESULTAT
pH de la llet	Tires indicadores de pH	7pH
Quantitat (gr) caseïna en 100	Àcid acètic i desnaturalització	13’25%
Prèsencia d’altres proteïnes	Biuret	Positiu
Midó	Lugol	Negatiu
Greixos	Sudan III	Positiu: té greixos
Glúcids reductors	Fehling	Té poder reductor perquè hi ha lactosa